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首頁 > 技術文章 > 氮含量測定-檢測氮含量的方法你掌握了嗎?

氮含量測定-檢測氮含量的方法你掌握了嗎?

點擊次數:2109 發布時間:2019-09-24
  一、材料:各種干燥、過篩(60~80目)的植物樣品
 
  二、儀器設備:消化管; 定氮蒸餾裝;三角燒瓶;微量滴定管; 量筒;容量瓶;燒杯;移液管等。
 
  三、植物樣品中氮元素含量檢測實驗步驟:
 
  1、樣品提取分離:準確稱取烘至恒重的樣品0.1000g~0.5000g(依樣品含氮量而定,含氮1~3mg宜),置10ml離心管中,加入5ml5%三氯yi酸,90℃水浴中浸提15min,不時攪拌,取出后用少量蒸餾水沖洗玻棒,待溶液冷卻后,4000rpm離心15min,上清液棄去。并用5%三氯yi酸洗沉淀2~3次,離心,棄去上清液,后用蒸餾水將沉淀無損地洗入鋪有濾紙的漏斗上,去掉濾液后,將沉淀和濾紙在50℃下烘干,用于蛋白氮的測定。
 
  2、樣品的消化:取4支消化管編號。1號管直接放入稱好的材料用于測定總氮,2號管放入上述烘干的濾紙和沉淀,用于蛋白氮的測定,3號管放入同樣濾紙一張、4號管不加任何樣品作為空白對照,注意將樣品放入消化管底部。向各消化管加濃硫酸5ml,混合催化劑0.3g~0.5g,將樣品浸泡數h或放置過夜后,在管口蓋一小漏斗,放在遠紅外消煮爐上加熱消化。開始時溫度可稍低,以防止內容物上升至管口。泡沫多時,可從小漏斗加入2~3滴無水yi醇。到管口出現白色霧狀物時,泡沫已不再產生;此時可逐漸升溫,使內容物達到微沸。直到消化液變為清澈透明為止。消化過程中,若在消化管上部發現有黑色顆粒時,應小心地轉動消化管,用消化液將它沖洗下來,以保證樣品消化完全。消化過程約需2~3h。
 
  3、定容消化完畢待溶液冷卻后,沿管壁仔細加入10ml左右無氨蒸餾水,以沖洗管壁,再將消化液小心轉入100ml容量瓶中。以無氨水少量多次沖洗消化管,洗滌液并入容量瓶。冷卻后用無氨水定容至刻度,混勻備用。
 
  4、蒸餾及滴定 以下幾步進行:
 
  A、儀器的洗滌:先經一般洗滌后,還要用水蒸氣洗滌??砂聪铝蟹椒ㄟM行蒸氣洗滌。先在蒸氣發生器中加入2/3體積的蒸餾水(事先加入幾滴濃硫酸,使其酸化,加入甲基紅指示劑,并加入少許沸石或毛細玻璃管以防止爆沸)。打開漏斗下的夾子,用電爐或酒精爐加熱至沸騰,使水蒸氣通入儀器的各個部分,以達到清洗的目的。在冷凝管下端放置一個三角瓶接收冷凝水。然后關緊漏斗下的夾子,繼續用蒸氣洗滌5min。沖洗完畢,夾緊蒸氣發生器與收集器之間的連接橡膠管,蒸餾瓶中的廢液由于減壓而倒吸進入收集器,打開收集器下端的活塞排除廢液。如此清洗2~3次,再在冷凝管下端換放一個盛有硼酸-指示劑混合液的三角瓶,使冷凝管下口完全浸沒在液面以下0.5cm處,蒸餾1~2min,觀察三瓶內的溶液是否變色。如不變色,表示蒸餾裝置內部已洗干凈。移去三角瓶,再蒸餾1~2min,用蒸餾水沖洗冷凝管下口,關閉電爐,儀器即可供測定樣品使用。
 
  B、標準硫酸銨測定為了熟悉蒸餾和滴定的操作技術,并檢驗實驗的準確性,找出系統誤差,常用已知濃度的標準硫酸銨測試三次。在三角瓶中加入20ml硼酸-指示劑混合液,將此三角瓶承接在冷凝管下端,并使冷凝管的出口浸入溶液中。注意在加樣前務必打開收集器活塞,以免三角瓶內液體倒吸。準確吸取2ml硫酸銨標準溶液,加到漏斗中。
 
  四、結果計算
 
  樣品中總氮量(%)=0.010×(V3—V0)×100×14/(W×1000×10)×100×氮的回收率
 
  樣品中蛋白氮含量(%)=0.0100×(V1-V2-V0)×100×14/(W×5×1000)×100×氮的回收率
 
  回收率(%)=0.0100×(V-V0)×14/(2.0×0.6×100)×100
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